高壓滅菌鍋在微生物試驗(yàn)中的操作指導(dǎo)

高壓滅菌鍋中的蒸汽不能外溢，壓力不斷上升，使水的沸點(diǎn)不斷提高，從而鍋內(nèi)溫度也隨之增加。在0.1MPa的壓力下，鍋內(nèi)溫度達(dá)121℃。在此蒸汽溫度下，可以很快殺死各種細(xì)菌及其高度耐熱的芽孢。
我們要知道，滅菌溫度應(yīng)是一個(gè)溫度范圍，而不是一個(gè)固定值。通常高壓蒸汽滅菌溫度是一個(gè)固定值，如試管斜面培養(yǎng)基和搖瓶液體培養(yǎng)基的滅菌要求為：121℃，20min，但在121℃只是滅菌溫度的下限，實(shí)際的滅菌溫度在121℃-124℃（或123℃）之間波動(dòng)。如果是自動(dòng)控溫型滅菌鍋，設(shè)定好滅菌溫度下限為121℃后，當(dāng)溫度升到124℃（或123℃）時(shí)，自動(dòng)斷電停止加熱，當(dāng)溫度降到121℃時(shí)，自動(dòng)開始加熱；如果是手動(dòng)控溫型滅菌鍋，當(dāng)溫度升到124℃時(shí)，手動(dòng)切斷電源停止加熱，當(dāng)溫度降到121℃時(shí)，手動(dòng)接通電源開始加熱。
高壓滅菌鍋在微生物試驗(yàn)中的操作說明：
1.首先將內(nèi)層滅菌桶取出，再向外層鍋內(nèi)加入適量的水，使水面與三角擱架相平為宜。
2.放回滅菌桶，并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠，以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。
3.加蓋并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對(duì)稱的方式同時(shí)旋緊相對(duì)的兩個(gè)螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣。
4.用電爐或煤氣加熱，并同時(shí)打開排氣閥，使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后，關(guān)上排氣閥，讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當(dāng)鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時(shí)，控制熱源，維持壓力至所需時(shí)間。
5.滅菌所需時(shí)間到后，切斷電源或關(guān)閉煤氣，讓高壓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降，當(dāng)壓力表的壓力降至0時(shí)，打開排氣閥，旋松螺栓，打開蓋子，取出滅菌物品。如果壓力未降到0時(shí)，打開排氣閥，就會(huì)因鍋內(nèi)壓力突然下降，使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口，造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。
6.將取出的滅菌培養(yǎng)基放入37℃溫箱培養(yǎng)24小時(shí)，經(jīng)檢查若無雜菌生長，即可待用。

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